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【柏恒科技小課堂】PCR反應(yīng)程序優(yōu)化之疾發(fā)布時(shí)間：2025-06-17

水之疾，至于漂石者，勢也”——《孫子兵法》。說只要速度足夠快，石頭就能漂在水面。上個(gè)月我們聊了一下降低退火變溫速率（PCR反應(yīng)程序優(yōu)化之緩）對PCR結(jié)果的優(yōu)化，今天換個(gè)方向，聊聊如何把PCR反應(yīng)時(shí)長進(jìn)行壓縮。在聊壓縮時(shí)長之前，需先對試管（Tube）/模塊(Block)控溫；普通/...

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2022
4-6

程序降溫盒使用經(jīng)驗(yàn)分析
程序降溫盒的使用方法直都搞不明白，覺得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時(shí)間(細(xì)胞剛開始還沒凍的時(shí)候就是室溫)，然后把細(xì)胞放進(jìn)去，再一起移到-80度，這樣才能實(shí)現(xiàn)程序降溫呢?時(shí)間使用長了，感覺里面的液體是不是異丙醇啊，使用...
2022
3-23

三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這...
2022
3-16

程序降溫盒使用小技巧
程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運(yùn)用于各種細(xì)胞類型，包括干細(xì)胞，原代細(xì)胞和細(xì)胞系。這對于大多數(shù)需要培養(yǎng)的細(xì)胞系來說是非常理想的。已經(jīng)通過干細(xì)胞，原代細(xì)胞和細(xì)胞系的使用，證明了提...
2022
3-10

迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項(xiàng)可有助于PCR中引物退火優(yōu)化的功能。梯度設(shè)定的目的是在模塊之間實(shí)現(xiàn)變化的溫度，通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降，使得可同時(shí)對于一系列的溫度進(jìn)行測試以獲取引物退火溫度。該技術(shù)的一種形式便是設(shè)計(jì)帶有三個(gè)或更...
2022
3-1

三槽梯度PCR儀科普知識大全，你真不一定都懂
三槽梯度PCR儀溫度的準(zhǔn)確性可能會對PCR的成敗與否起決定性作用，因?yàn)镻CR的三個(gè)主要步驟都依賴于溫度。類似地，加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。因此，所使用的PCR儀能在模塊之間準(zhǔn)確到達(dá)設(shè)定的...
2022
1-21

雙槽梯度PCR儀應(yīng)該這樣使用
雙槽梯度PCR儀的反應(yīng)原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火（復(fù)性）--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后，使模板DN...

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